Kit tinh sạch nhanh DNA Vi khuẩn.

Rapid Bacteria Genomic DNA Isolation Kit/ Kit tinh sạch nhanh DNA Vi khuẩn.

* Hãng sản xuất: Biobasic – Canada

* CAT.#: BS8225

* Quy cách: 50 prep

* Tình trạng hàng: Có sẵn

* Bộ kit được thiết kế để tinh sạch nhanh chóng DNA hệ gen từ nhiều loại vi khuẩn Gram âm hoặc Gram dương. DNA tinh sạch có thể được sử dụng cho nhiều mục đích như PCR, phân hủy bằng enzym giới hạn, lai tạo và các nghiên cứu khác.

* Bảo quản: ở nhiệt độ phòng trong vòng 1 năm

 Đặc trưng

– Nhanh chóng và đơn giản.

– Chất lượng DNA. OD260 / OD280 của DNA tinh khiết thường là 1,8 ~ 1,9.

– Không có chất độc hại.

Quy trình thực hiện

1. Bước 1

A. Vi khuẩn gram âm (E. coli, streptococcus, pneumococcus, v.v.)

a. Lấy 1 ml dịch nuôi cấy qua đêm (khoảng 2 x 10^9 tế bào) vào ống ly tâm và ly tâm ở 10.000 x g trong 30s, loại bỏ phần nổi phía trên.

b. Thêm 400 μl Universal Buffer Digestion, vortex và ủ ở 65 ° C cho đến khi các tế bào được dung giải.

Lưu ý 1: Thường thời gian ủ từ 30 ~ 60 phút. Nếu chỉ có DNA không có RNA, thêm 20 μl RNase A (20 mg / ml không cung cấp trong kit) và ủ ở nhiệt độ phòng trong 5 phút trước khi thực hiện bước 2

Lưu ý 2: Sự phân hóa đệm có thể tạo thành kết tủa trong quá trình bảo quản lâu dài. Làm ấm ở 65 ° C để hòa tan kết tủa

B. Vi khuẩn gram dương ((staphylococcus, Corynebacterum

diphtheriae, v.v.)

a. Lấy 1 ml dịch nuôi cấy qua đêm (khoảng 2 x 10^9 tế bào) vào ống ly tâm và ly tâm ở 10.000 x g trong 30s, loại bỏ phần nổi phía trên.

b. Thêm 180 μl dung dịch lysozyme (20 mg / ml lysozyme, 20

mM Tris-HCl, pH 8,0, 2,5 mM EDTA, 1% Triton X-100. Không có trong bộ kit). Trộn kỹ và ủ ở 37 ° C trong 30-60 phút. Ly tâm ở 10.000 x g trong 1 phút, loại bỏ phần nổi phía trên.

c. Thêm 400 μl Universal Buffer Digestion, vortex và ủ ở 65 ° C cho đến khi các tế bào được dung giải.

Lưu ý 1: Thường thời gian ủ từ 30 ~ 60 phút. Nếu chỉ có DNA không có RNA, thêm 20 μl RNase A (20 mg / ml không cung cấp trong kit) và ủ ở nhiệt độ phòng trong 5 phút trước khi thực hiện bước 2

Lưu ý 2: Sự phân hóa đệm có thể tạo thành kết tủa trong quá trình bảo quản lâu dài. Làm ấm ở 65 ° C để hòa tan kết tủa

2. Bước 2. Thêm 200 μl Buffer PB, trộn bằng cách đảo. Ủ ở -20 độ C trong 5phút.

3. Bước 3. Ly tâm ở 12.000 x g trong 5 phút ở nhiệt độ phòng. Chuyển phần nổi phía trên sang ống 1,5 ml mới.

4. Bước 4. (Tùy chọn) Thêm 0,2 ml cloroform vào phần nổi phía trên, trộn đều bằng cách đảo 10 lần. Ly tâm ở 12.000 x g trong 2 phút. Cẩn thận chuyển phần nổi phía trên vào ống 1,5 ml sạch.

5. Bước 5. Thêm thể tích tương đương của isopropanol (khoảng 0,3 ~ 0,5 ml) vào trộn đều bằng cách đảo 5 lần. Ủ ở nhiệt độ phòng trong 2 ~ 5 phút. Ly tâm ở 12.000 x g trong 5phút, cẩn thận loại bỏ phần nổi phía trên.

6. Bước 6. Thêm 1 ml etanol 75% đã làm lạnh trước vào, trộn đều bằng cách đảo 10 lần. Ly tâm ở 12.000 x g trong 1 phút, loại bỏ

phần nổi phía trên.

7. Bước 7. Lặp lại bước 6

8. Bước 9. Làm khô trong không khí ở nhiệt độ phòng nắp mở trong 2 ~ 5 phút.

Lưu ý: Đừng để quá khô.

9. Bước 9. Thêm 50 ~ 200 μl TE (10 mmol / L Tris, 1 mmol / L EDTA, pH 8,0) đệm để phân giải DNA. Giữ ở 4 ° C trong vài giờ cho đến khi DNA bị tan hoàn toàn. DNA tinh khiết giữ ở -20°C để bảo quản lâu dài.

THÔNG TIN LIÊN HỆ: Công ty TNHH TEKCO Việt Nam

CHUYÊN CUNG CẤP:

– Hóa chất, mt dùng cho sinh học phân tử, nuôi cấy TB, nuôi cấy mô,..

– Các kit xét nghiệm, điện di, kháng sinh,…

– Các loại hóa chất tinh khiết, thiết bị dụng cụ vật tư tiêu hao dùng cho PTN,…

Tell/ Zalo: 0986.869.775( Vân)

Email: Sales.tekco2@gmail.com