Nuôi cấy mô thực vật: Hiện trạng và cơ hội

(P/s:Tổng quan các phương pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật và một số thành tựu nghiên cứu trên thế giới)

(Nguồn: tổng hợp)

1.Kiến thức cơ bản về tế bào thực vật và nuôi cấy mô

Trong nuôi cấy tế bào thực vật, các mô và cơ quan thực vật được nuôi cấy invitro trên môi trường nhân tạo, trong môi trường vô trùng và có kiểm soát. Kỹ thuật này phụ thuộc chủ yếu vào khái niệm tính toàn năng của tế bào thực vật, đề cập đến khả năng của một tế bào đơn lẻ mang biểu hiện bộ gen đầy đủ bằng cách phân chia tế bào. Cùng với tính toàn năng của tế bào thực vật, khả năng thay đổi quá trình trao đổi chất, sinh trưởng và phát triển của tế bào cũng không kém phần quan trọng để tái sinh thành cây hoàn chỉnh. Môi trường nuôi cấy mô thực vật chứa tất cả các chất dinh dưỡng cần thiết cho sự sinh trưởng và phát triển bình thường của cây trồng. Chủ yếu bao gồm các chất dinh dưỡng đa lượng, vi lượng, vitamin, các thành phần hữu cơ khác, chất điều hòa sinh trưởng thực vật, nguồn cacbon và một số chất tạo gel trong trường hợp môi trường rắn. Môi trường Murashige và Skoog (môi trường MS) được sử dụng rộng rãi nhất để nhân giống sinh dưỡng của nhiều loài thực vật trong ống nghiệm. Độ pH của giá thể cũng rất quan trọng ảnh hưởng đến cả sự phát triển của cây trồng và hoạt động của các chất điều hòa sinh trưởng thực vật. Độ PH thích hợp được điều chỉnh đến giá trị từ 5,4 – 5,8. Cả môi trường rắn và lỏng đều có thể được sử dụng để nuôi cấy. Thành phần của môi trường, đặc biệt là hoocmon thực vật và nguồn nitơ có ảnh hưởng sâu sắc đến phản ứng của mẫu ban đầu.

-Chất điều hòa sinh trưởng thực vật (PGR’s) đóng vai trò thiết yếu trong việc xác định con đường phát triển của tế bào và mô thực vật trong môi trường nuôi cấy. Auxin, cytokinin và gibberellin là những chất điều hòa sinh trưởng thực vật được sử dụng phổ biến nhất. Loại và nồng độ hormone được sử dụng chủ yếu phụ thuộc vào loài thực vật, mô hoặc cơ quan được nuôi cấy và mục tiêu của thí nghiệm. Auxin và cytokinin là những chất điều hòa sinh trưởng thực vật được sử dụng rộng rãi nhất trong nuôi cấy mô thực vật và hàm lượng của chúng quyết định kiểu nuôi cấy được thiết lập hoặc tái sinh. Nồng độ cao của các auxin thường hỗ trợ sự hình thành rễ, trong khi nồng độ cao của các cytokinin thúc đẩy sự tái sinh chồi. Sự cân bằng của cả auxin và cytokinin dẫn đến sự phát triển của khối lượng các tế bào không biệt hóa được gọi là mô sẹo.

2. Nuôi cấy mô trong nông nghiệp

-Là một công nghệ mới, nuôi cấy mô thực vật có tác động lớn đến cả nông nghiệp và công nghiệp, thông qua việc cung cấp các loại cây trồng cần thiết để đáp ứng nhu cầu ngày càng tăng của thế giới. Nó đã có những đóng góp đáng kể cho sự tiến bộ của khoa học nông nghiệp trong thời gian gần đây và ngày nay chúng trở thành một công cụ không thể thiếu trong nông nghiệp hiện đại.

-Công nghệ sinh học được đưa vào thực hành nông nghiệp với tốc độ chưa có tiền lệ. Nuôi cấy mô cho phép sản xuất và nhân giống cây trồng thuần nhất về mặt di truyền, sạch bệnh. Nuôi cấy trong ống nghiệm tế bào và mô là một công cụ hữu ích để tạo ra sự biến đổi thể chất. Sự biến đổi di truyền gây ra bởi nuôi cấy mô có thể được sử dụng như một nguồn biến dị để thu được các kiểu gen ổn định mới. Sự can thiệp của phương pháp tiếp cận công nghệ sinh học để tái sinh invitro, kỹ thuật vi nhân giống hàng loạt và nghiên cứu chuyển gen ở các loài cây đã được khuyến khích. Nuôi cấy invitro phôi hợp tử trưởng thành hoặc chưa trưởng thành được áp dụng để phục hồi các cây thu được từ phép lai giữa các gen không tạo ra hạt có khả năng sinh sản. Kỹ thuật di truyền có thể tạo ra một số giống cây trồng cải tiến có tiềm năng năng suất cao và khả năng chống chịu sâu bệnh. Công nghệ biến đổi gen dựa trên các khía cạnh kỹ thuật của nuôi cấy mô thực vật và sinh học phân tử để:

– Sản xuất giống cây trồng cải tiến

– Sản xuất cây sạch bệnh (vi rút)

– Biến đổi gen

– Sản xuất các chất chuyển hóa thứ cấp

– Sản xuất giống chịu mặn, hạn, nắng nóng

3. Bảo tồn loài

-Nuôi cấy tế bào và cơ quan trong ống nghiệm cung cấp một nguồn thay thế để bảo tồn các kiểu gen có nguy cơ tuyệt chủng. Bảo tồn loài sống trên toàn thế giới đang ngày càng trở thành một hoạt động thiết yếu do sựu tuyệt chủng của các loài thực vật cao và nhu cầu bảo vệ nguồn gốc thực vật của các quốc gia ngày càng tăng. Các quy trình nuôi cấy mô có thể được sử dụng để bảo tồn các mô sinh dưỡng khi mục tiêu bảo tồn là dòng vô tính thay vì hạt giống, để giữ nền tảng di truyền của cây trồng và để tránh mất đi nguồn gốc được bảo tồn do thiên tai hoặc căng thẳng sinh học hay phi sinh học. Các loài thực vật không tạo ra hạt giống (cây vô sinh) hoặc có hạt giống “ngoan cố” không thể bảo quản trong thời gian dài có thể được bảo quản thành công thông qua kỹ thuật invitro để duy trì ngân hàng gen

4. Nuôi cấy phôi

-Nuôi cấy phôi là một kiểu nuôi cấy mô thực vật được sử dụng để nuôi cấy phôi từ hạt và noãn trong môi trường dinh dưỡng. Trong nuôi cấy phôi, cây phát triển trực tiếp từ phôi hoặc gián tiếp thông qua hình thành mô sẹo và sau đó hình thành chồi và rễ. Kỹ thuật này đã được phát triển để phá vỡ trạng thái ngủ của hạt, kiểm tra sức sống của hạt, sản xuất các loài quý hiếm và cây đơn bội. Đây là một kỹ thuật hiệu quả được sử dụng để rút ngắn chu kỳ sinh sản của thực vật bằng cách nuôi cấy phôi đã cắt bỏ và làm giảm thời gian ngủ dài của hạt.

5. Biến đổi gen

-Biến nạp gen là khía cạnh gần đây nhất của nuôi cấy mô và tế bào thực vật cung cấp giá trị trung bình của việc chuyển các gen có tính trạng mong muốn vào cây và phục hồi cây chuyển gen. Kỹ thuật này có tiềm năng lớn trong việc cải thiện di truyền của các loại cây trồng khác nhau bằng cách tích hợp vào công nghệ sinh học thực vật và các phương pháp nhân giống. Nó có một vai trò đầy hứa hẹn đối với việc giới thiệu các đặc điểm nông học quan trọng như tăng năng suất, chất lượng tốt hơn và nâng cao khả năng chống chịu sâu bệnh.

-Sự chuyển gen ở thực vật được thực hiện bằng phương pháp trung gian vector (chuyển gen gián tiếp) hoặc phương pháp chuyển gen trực tiếp. Trong số các phương pháp chuyển gen phụ thuộc vectơ, phương pháp chuyển gen qua trung gian vi khuẩn Agrobacterium được sử dụng rộng rãi nhất để biểu hiện gen ngoại lai trong tế bào thực vật. Các vectơ dựa trên vi rút cung cấp một cách thay thế để biểu hiện protein ổn định và nhanh chóng trong tế bào thực vật, do đó cung cấp một phương pháp hiệu quả trong sản xuất protein tái tổ hợp trên quy mô lớn.

6. Tổng hợp protoplast

-Lai soma là một công cụ quan trọng của việc tạo giống cây trồng và cải tiến cây trồng bằng cách tạo ra các giống lai giữa các loài và giữa các dòng. Kỹ thuật này liên quan đến sự hợp nhất các nguyên bào của hai bộ gen khác nhau, sau đó chọn lọc các tế bào lai soma mong muốn và tái sinh các cây lai. Sự dung hợp protoplast cung cấp một biện pháp hiệu quả của việc chuyển gen với tính trạng mong muốn từ loài này sang loài khác và có tác động ngày càng tăng đến việc cải thiện cây trồng.

-Sự hợp nhất trong ống nghiệm của protoplast mở ra một hướng phát triển các cây lai độc đáo bằng cách vượt qua các rào cản của sự không tương thích về giới tính. Kỹ thuật này đã được áp dụng trong ngành nông nghiệp để tạo ra các giống lai mới có năng suất trái cao và khả năng kháng bệnh tốt hơn. Các cây lai thành công thu được khi hợp nhất nguyên sinh chất từ cây có múi với các loài citrinae có liên quan khác.

7.Sản xuất đơn bội

-Các kỹ thuật nuôi cấy mô cho phép tạo ra cây đồng hợp tử trong một khoảng thời gian tương đối ngắn thông qua nuôi cấy nguyên sinh chất, bao phấn và vi bào tử thay vì nhân giống thông thường.

Cây đơn bội là cây bất thụ có bộ nhiễm sắc thể đơn được chuyển thành thể lưỡng bội đồng hợp tử bằng cách tự nhân đôi nhiễm sắc thể tự phát hoặc nhân đôi. Sự nhân đôi của nhiễm sắc thể phục hồi khả năng sinh sản của thực vật, tạo ra các cây đơn bội kép có tiềm năng trở thành giống thuần chủng mới. Thuật ngữ androgenesis đề cập đến việc tạo ra cây đơn bội từ các tế bào phấn non mà không trải qua quá trình thụ tinh. Công nghệ đơn bội hiện nay đã trở thành một phần không thể thiếu trong các phương pháp chọn tạo giống cây trồng bằng cách tăng tốc độ sản xuất các dòng cận huyết và khắc phục các hạn chế về khả năng chết của hạt và khả năng không tồn tại của phôi. Kỹ thuật này có một ứng dụng đáng chú ý trong việc chuyển đổi gen bằng cách tạo ra các cây đơn bội có khả năng chống lại các áp lực sinh học và phi sinh học khác nhau. Việc đưa các gen có tính trạng mong muốn ở trạng thái đơn bội, sau đó là sự nhân đôi của nhiễm sắc thể đã dẫn đến việc sản xuất lúa mì lai đơn bội kép và cây trồng chịu hạn đã thành công.

8. Hiện trạng và tương lai của nuôi cấy mô thực vật

Những thập kỷ qua của công nghệ sinh học tế bào thực vật đã phát triển như một kỷ nguyên mới trong lĩnh vực công nghệ sinh học, tập trung vào việc sản xuất một số lượng lớn các sản phẩm thực vật thứ cấp. Trong nửa sau của thế kỷ trước, sự phát triển của kỹ thuật di truyền và kỹ thuật sinh học phân tử đã cho phép xuất hiện các sản phẩm nông nghiệp mới và cải tiến đã chiếm nhu cầu ngày càng cao trong hệ thống sản xuất của một số quốc gia trên toàn thế giới. Tuy nhiên, những điều này sẽ không thể xảy ra nếu không có sự phát triển của kỹ thuật nuôi cấy mô, vốn cung cấp các công cụ để đưa thông tin di truyền vào tế bào thực vật. Gần đây, một trong những phương pháp hứa hẹn nhất để sản xuất protein và các dược chất khác, chẳng hạn như kháng thể và vắc-xin, là sử dụng thực vật chuyển gen. Thực vật chuyển gen là một giải pháp thay thế kinh tế cho các hệ thống sản xuất dựa trên quá trình lên men. Các loại vắc xin hoặc kháng thể được sản xuất từ thực vật (plantibodies) đặc biệt nổi bật, vì thực vật không gây bệnh cho người, do đó giảm chi phí sàng lọc vi rút và độc tố vi khuẩn.

9. Sự phát sinh phôi xôma và sự phát sinh cơ quan

– Tạo phôi soma: là một phương pháp tái sinh thực vật invitro được sử dụng rộng rãi như một công cụ công nghệ sinh học quan trọng để nhân giống vô tính bền vững. Đó là một quá trình mà các tế bào hoặc mô soma phát triển thành các phôi đã biệt hóa. Các phôi soma này có thể phát triển thành cây hoàn chỉnh mà không cần trải qua quá trình thụ tinh hữu tính như phôi hợp tử đã thực hiện. Quá trình hình thành phôi soma có thể được bắt đầu trực tiếp từ các mẫu cấy hoặc gián tiếp bằng cách tạo hàng loạt các tế bào phát triển vô tổ chức được đặt tên là callus.

-Tái sinh thực vật thông qua hình thành phôi soma xảy ra bằng cách cảm ứng nuôi cấy phôi từ hạt, lá hoặc thân hợp tử và nhân lên tiếp tục của phôi. Sau đó, phôi trưởng thành được nuôi cấy để nảy mầm và phát triển cây con, và cuối cùng được chuyển vào đất. Các chất điều hòa sinh trưởng thực vật đóng vai trò quan trọng trong quá trình tái sinh và tăng sinh của phôi xôma. Hiệu quả cao nhất của mô sẹo phôi được tạo ra bằng cách nuôi cấy các đoạn thân nốt sần của hoa hồng lai trên môi trường có bổ sung nhiều PGR đơn lẻ hoặc kết hợp. Mô sẹo phôi này cho thấy tỷ lệ nảy mầm của phôi soma cao khi được nuôi cấy trên axit abscisic (ABA) đơn lẻ. Phát sinh phôi soma không chỉ là một quá trình tái sinh cây để nhân giống hàng loạt mà còn được coi là một công cụ có giá trị để thao tác di truyền. Quy trình này cũng có thể được sử dụng để phát triển các cây trồng có khả năng chống chịu các loại căng thẳng khác nhau và đưa vào các gen bằng cách chuyển đổi gen.

– Sự phát sinh cơ quan: đề cập đến việc sản xuất các cơ quan thực vật như rễ, chồi và lá có thể phát sinh trực tiếp từ mô phân sinh hoặc gián tiếp từ các khối tế bào chưa phân hóa (mô sẹo). Tái sinh thực vật thông qua quá trình phát sinh cơ quan liên quan đến việc sản xuất mô sẹo và biệt hóa các mô phân sinh thành các cơ quan bằng cách thay đổi nồng độ các hormone tăng trưởng thực vật trong môi trường dinh dưỡng. Skoog và Muller là những người đầu tiên chứng minh rằng tỷ lệ cytokinin trên auxin cao kích thích sự hình thành chồi trong mô sẹo thuốc lá trong khi tỷ lệ auxin trên cytokinin cao kích thích sự tái sinh rễ.

10. Nuôi cấy mô trong dược phẩm

Nuôi cấy mô và tế bào thực vật có nhiều hứa hẹn đối với việc sản xuất có kiểm soát vô số chất chuyển hóa thứ cấp hữu ích. Nuôi cấy tế bào thực vật kết hợp giá trị của hệ thống toàn thực vật với hệ thống nuôi cấy tế bào vi sinh vật và động vật để tạo ra các chất chuyển hóa thứ cấp có giá trị. Trong việc tìm kiếm các giải pháp thay thế sản xuất các hợp chất thuốc từ thực vật, các phương pháp tiếp cận công nghệ sinh học, đặc biệt là nuôi cấy mô thực vật, được phát hiện có tiềm năng như một chất bổ sung cho nông nghiệp truyền thống trong sản xuất công nghiệp các chất chuyển hóa thực vật có hoạt tính sinh học.

– Nuôi cấy huyền phù tế bào: Các hệ thống nuôi cấy huyền phù tế bào ngày nay được sử dụng để nuôi cấy quy mô lớn các tế bào thực vật mà từ đó các chất chuyển hóa thứ cấp có thể được chiết xuất. Nuôi cấy huyền phù được phát triển bằng cách chuyển một phần của mô sẹo vào môi trường lỏng và được duy trì trong các điều kiện thích hợp về sục khí, tác động, ánh sáng, nhiệt độ và các thông số vật lý khác. Nuôi cấy tế bào không chỉ mang lại các chất phi hóa học tiêu chuẩn xác định với khối lượng lớn mà còn loại bỏ sự hiện diện của các hợp chất gây nhiễu xuất hiện trong các cây trồng ngoài đồng ruộng. Ưu điểm của phương pháp này là cuối cùng có thể cung cấp nguồn sản phẩm tự nhiên liên tục, chất lượng. Ưu điểm chính của nuôi cấy tế bào là tổng hợp các chất chuyển hóa thứ cấp có hoạt tính sinh học, chạy trong môi trường được kiểm soát, không phụ thuộc vào điều kiện khí hậu và đất đai. Một số loại lò phản ứng sinh học khác nhau đã được sử dụng để nuôi cấy hàng loạt tế bào thực vật.

Một số ancaloit quan trọng về mặt y học, thuốc chống ung thư, protein tái tổ hợp và các chất phụ gia thực phẩm được sản xuất trong các mẫu tế bào và mô thực vật khác nhau. Những tiến bộ trong lĩnh vực nuôi cấy tế bào để sản xuất các hợp chất y học đã giúp sản xuất nhiều loại dược phẩm như alkaloid, terpenoit, steroid, saponin, phenol, flavanoid và axit amin. Một số trong số này hiện đã được bán trên thị trường như shikonin và paclitaxel (Taxol). Những tiến bộ trong phương pháp tiếp cận mở rộng quy mô và kỹ thuật cố định góp phần làm tăng đáng kể số lượng ứng dụng nuôi cấy tế bào thực vật để sản xuất các hợp chất có giá trị gia tăng cao.
11. Cấy lông rễ

Nuôi cấy có tổ chức, và đặc biệt là nuôi cấy gốc, có thể đóng góp đáng kể vào việc sản xuất các chất chuyển hóa thứ cấp. Hầu hết các nỗ lực nghiên cứu sử dụng nuôi cấy biệt hóa thay vì nuôi cấy huyền phù tế bào đều tập trung vào rễ đã biến nạp (có lông). Agrobacterium rhizogenes gây nên hiện tượng lông rễ ở cây trồng. Rễ tân sinh (ung thư) do nhiễm A. rhizogenes được đặc trưng bởi tốc độ phát triển cao, ổn định di truyền và phát triển trong môi trường không có hormone. Tính ổn định cao và các tính năng năng suất cho phép khai thác rễ lông tơ như một công cụ công nghệ sinh học có giá trị để sản xuất các chất chuyển hóa thứ cấp của thực vật. Việc nuôi cấy rễ biến đổi gen này có thể tạo ra mức độ chất chuyển hóa thứ cấp có thể so sánh với mức độ của các cây nguyên vẹn. Công nghệ rễ lông đã được cải tiến mạnh mẽ nhờ kiến thức gia tăng về các cơ chế phân tử nền tảng cho sự phát triển của chúng. Tối ưu hóa thành phần các chất dinh dưỡng cho nuôi cấy rễ lông là rất quan trọng để đạt được sản lượng cao các chất chuyển hóa thứ cấp.

12. Thành tựu trong nuôi cấy mô trên thế giới

Vi nhân giống lan hồ điệp “The Moth Orchids”

-Hoa lan nhân giống sinh dưỡng của lan hồ điệp rất khó và tốn nhiều thời gian. Ngoài ra, không đạt được các đặc tính mong muốn của cây con và độ đồng đều.

-Các nghiên cứu nhân giống in vitro của lan hồ điệp có mục tiêu là phát triển một quy trình tái sinh thực vật từ mô sẹo. Do đó, kỹ thuật nuôi cấy invitro được áp dụng để nhân giống nhanh các loài lan quan trọng về mặt thương mại. Tái sinh từ mô sẹo cung cấp một cách để khắc phục vấn đề thiếu mẫu cấy. Mô sẹo của phalaenopsis thu được trước đây từ cây lan trưởng thành được sử dụng làm nguồn mẫu. Mô sẹo được duy trì trên môi trường MS được bổ sung 3,0% sucrose, 0,8% agar, và các nồng độ khác nhau của BAP và 2, 4-D. Callus được nuôi cấy phụ sau mỗi 30 ngày để tăng sinh. Sự tăng sinh mô sẹo tối đa đạt được khi môi trường được bổ sung 0,5 mg /l BAP. Màu xanh lá cây tươi và không bị bở đã thu được. Để tái sinh và kéo dài chồi, mô sẹo được chuyển sang môi trường MS có bổ sung BAP và GA3 ở các nồng độ khác nhau. Sự kéo dài chồi tối đa thu được trong môi trường bổ sung 1,0 mg/l GA3.

-Các chồi tái sinh cho thấy sự phát triển vượt trội của rễ khi được chuyển sang môi trường có bổ sung 2,0 mg / l IBA. Các nghiên cứu sau sẽ tập trung vào các thành phần giá thể khác nhau phù hợp nhất cho việc thích nghi của cây tái sinh.

Nuôi cấy mô của thuốc lá (NicotianatabacumL.)

Thuốc lá là một loại cây trồng quan trọng của Pakistan, chiếm một diện tích lớn được canh tác. Việc nhân giống vô tính bốn giống thuốc lá lai có hàm lượng nicotin thấp quan trọng là PGH-01, PGH-02, PGH-04 và PGH-09 được thực hiện với mục tiêu đặc biệt là thương mại hóa cây nuôi cấy mô cho nông dân và ngành công nghiệp. Các cây mẹ được cung cấp bởi Hội đồng Thuốc lá Pakistan (PTB). Lá và mô phân sinh được sử dụng làm mẫu cấy để bắt đầu nuôi cấy mô sẹo. Cảm ứng và tăng sinh mô sẹo được thực hiện trên môi trường MS có bổ sung các nồng độ khác nhau của 2,4-D. Sự phát triển tốt của mô sẹo thu được ở môi trường chứa 1,0 mg / l 2,4-D. Callus được chuyển sang môi trường tiếp theo để tái sinh chồi. Số lượng chồi hiệu quả thu được khi chuyển dịch nuôi cấy sang môi trường MS có bổ sung 0,5 mg / l BAP. Đối với cảm ứng rễ, các nồng độ IBA và NAA khác nhau đã được thử nghiệm và kết quả được tìm thấy tốt nhất trên cùng một môi trường được bổ sung 2,0 mg / l IBA.

Nhân giống in vitro cây Mật nhân (Stevia rebaudianaBertoni) Việc nhân giống vô tính trong ống nghiệm của cây mật nhân Stevia rebaudiana được tiến hành bằng cách cấy hạt trên môi trường MS và đặt dưới quang kỳ 16 giờ sáng và 8 giờ tối trong phòng sinh trưởng. Các cây con có bốn đốt đã được chia nhỏ thành các đoạn 0,5 cm của các đoạn và được sử dụng làm mẫu cấy. Để nhân chồi, các mẫu được cấy trên môi trường MS có bổ sung 3,0% sucrose và 0,5, 1,0, 2,0, 3,0 và 4,0 mg / l BAP và Kn (Kinetin) đơn hoặc kết hợp với 0,25 và 0,5 mg / l IAA . Môi trường MS chứa 2,0 mg / l BAP cho thấy phản ứng tốt nhất đối với sự hình thành nhiều chồi, trong khi chiều dài chồi cao nhất (3,73 ± 0,14 cm) trên mỗi microhoot được quan sát trên môi trường MS có chứa 2,0mg/l kinetin và 0,25 mg / l IAA sau 15 ngày cấy giống. Các micro đã cắt bỏ được nuôi cấy trên môi trường MS có bổ sung 0,25, 0,5, 1,0 và 1,5 mg / l NAA và IBA riêng biệt cho cảm ứng rễ. Sự ra rễ tối ưu (81%) được quan sát trên môi trường MS chứa 0,5 mg / l NAA với 2% sucrose trong vòng hai tuần sau khi cấy chuyển. Các cây con đã bén rễ thành công và chuyển sang nhà kính dưới cường độ ánh sáng thấp. Quy trình nhân giống vô tính trong ống nghiệm này của Stevia rebaudiana đã được tối ưu hóa cho môi trường, do đó sẽ rất hữu ích khi thiết lập và nuôi trồng Steviarebaudiana để sản xuất quy mô thương mại trong các điều kiện môi trường khác nhau ở Pakistan.
Nhân và tái sinh Khoai tây (SolanumtuberosumL.)

-Nghiên cứu được thực hiện với mục tiêu nhân rộng hàng loạt ba giống khoai tây đúng loại, tức là Desiree, Diamant và Cardinal. Vật liệu thực vật cho nghiên cứu này do Four Brothers Agri Services Pakistan cung cấp.

-Củ khoai tây sạch bệnh được rửa sạch bằng chất tẩy rửa và nước cất để loại bỏ tạp chất và để cho nảy mầm. Mầm 5 ngày tuổi được sử dụng làm mẫu cấy để sinh sôi trực tiếp. Các mẫu được khử trùng bề mặt trong chất tẩy rửa trong 10 phút, sau đó bằng dung dịch thủy ngân clorua 0,1% trong 5 phút, sau đó rửa ba lần bằng nước cất đã khử trùng. Các mầm được cắt vô trùng thành các đoạn 10 mm có chứa một đốt và được cấy vào môi trường. Môi trường Espinosa cộng với vitamin B5 bổ sung với các nồng độ khác nhau của BAP và GA3 đơn lẻ và kết hợp đã được sử dụng. Chiều dài chồi cao nhất của chồi được quan sát thấy khi có 0,5 mg / l BAP và 0,4 mg / l GA3 với khả năng tạo ra cây con tối đa trên mỗi mẫu. Đối với cảm ứng ra rễ, môi trường tương tự đã được sử dụng với các nồng độ NAA và IBA khác nhau. NAA ở mức 2,0 mg / l gây ra sự phát triển rễ cao nhất. Các cây con gốc đã được di thực thành công và giao cho công ty để canh tác.

Nuôi cấy mô hạt (Jatrophacurcas L.)

-Các nghiên cứu nghiên cứu về nuôi cấy mô của cây Jatropha có mục tiêu phát triển quy trình nhân giống hàng loạt các cây ưu tú được lựa chọn trên cơ sở sản lượng hạt và hàm lượng dầu cao hơn. nghiên cứu ống nghiệm. Các mẫu cấy mô phân sinh ở lá và ngọn được phân lập từ cây con 7 ngày tuổi của Jatrophacurcas, được sử dụng để tạo mô sẹo.

-Môi trường MS bổ sung các công thức điều hòa sinh trưởng khác nhau bao gồm 2,4-D và IBA đã được sử dụng. Sự phát triển tuyệt vời của mô sẹo trên các mẫu lá đã thu được trong môi trường bổ sung 1,0 mg / l 2,4-D. Mô sẹo được tạo ra từ mẫu cấy lá ở tất cả các nồng độ IBA tăng trưởng nhanh hơn trong thời gian 7 đến 30 ngày nuôi cấy và sau đó ổn định với tốc độ tăng trưởng chậm. Trong khi 1,0 mg / L 2,4-D được chứng minh là hiệu quả nhất trong việc tạo ra mô sẹo trên quy mô lớn trong thời gian ngắn. Mô phân sinh đỉnh được sử dụng làm mẫu cấy để tái sinh chồi trực tiếp. Sự ra rễ từ mô phân sinh đạt được hiệu quả trên MS được bổ sung 1,5, 2,0 và 2,5 mg / l IBA. Cảm ứng rễ với 2,0 mg / l IBA là hiệu quả nhất và rễ cũng phát triển rễ phụ.

-Trong tương lai gần, quá trình phát sinh phôi soma và tái sinh chồi từ mô sẹo sẽ được thử nghiệm trong môi trường MS có bổ sung các nồng độ BA khác nhau. Cây tái sinh sẽ được di thực và đưa đi trồng trên thực địa trong các điều kiện khí hậu và đất đai khác nhau để nghiên cứu thêm.

THÔNG TIN LIÊN HỆ: Công ty TNHH TEKCO Việt Nam

CHUYÊN CUNG CẤP:

– Hóa chất, mt dùng cho sinh học phân tử, nuôi cấy TB, nuôi cấy mô,..

– Các kit xét nghiệm, điện di, kháng sinh,…

– Các loại hóa chất tinh khiết, thiết bị dụng cụ vật tư tiêu hao dùng cho PTN,…

https://hoachattekco.com/

Tell/ Zalo: 0986.869.775( Vân)

Email: Sales.tekco2@gmail.com

Nuôi cấy mô thực vật: Hiện trạng và cơ hội

Đăng nhập